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　梭菌的生化性状测定，须用特殊生化培养基。几种主要病原梭菌的基本生化特性如表22-5。

 

　　产气荚膜梭菌(Cl.perfringens)

　　本菌旧名魏氏梭菌或产气荚膜杆菌。在自然界分布极广，可见于土壤、污水、饲料、食物、粪便以及人畜肠道等中，在一定条件下，也可引起多种严重疾病。

　　形态及染色特征　菌体直杆状，两端钝圆，0.6～2.4um×l.3～19.0um，单在或成双，短链很少出现，革兰氏染色阳性。无鞭毛，不运动。芽孢大而卵圆，位于菌体中央或近端，使菌体膨胀，但在一般条件下罕见形成芽抱。多数菌株可形成荚膜，荚膜多糖的组成可因菌株不同而有变化。DNA的G+Cmol%为24～27。

　　培养特性　本菌对厌氧程度的要求并不严，甚至在Eh=200～250mv的环境内也能生长。对营养要求不苛刻，在普通培养基上可生长，若加葡萄糖、血液，则生长更好。A、D和E型菌株的最适生长温度为45℃，B和C型为37～45C，多数菌株的可生长温度范围为20～50℃，偶有菌株于6℃有一定的繁殖力。此菌生长非常迅速，在适宜的条件下增代时司仅为8min。据此特性，可用高温快速培养法进行选择分离，即在45℃下每培养3～4h传代一次，可较易获得纯培养。

 

　　在绵羊血琼脂平板上，可形成直径2～5mm、圆形、边缘整齐、灰色至灰黄色、表面光滑半透明、圆屋顶状的菌落，偶尔出现裂叶状边缘的粗糙菌落及丝状边缘的不规则扁平菌落等。菌落周围有溶血环，在兔、绵羊、牛、马或人血琼脂平板上，大多数菌株可产生双环溶血，内环为由毒素所弓起的完全溶血，外围由α毒素产生的不完全溶血环，些B型和C型菌株在绵羊或牛血琼脂平板上可由8毒素产生的较宽溶血环。

　　在乳糖牛奶卵黄琼脂平板上，菌落周围出现乳白色浑浊圈，是因所产生的a毒素分解卵黄中的卵磷脂所致，此反应可被α抗毒素抑制。由于发酵乳糖，菌落周围的培养基颜色发生变化 (中性红指示剂呈粉红色)。不消化牛奶，不分解游离脂肪，菌落周围不出现透明环及虹彩层。

　　在PYG(含蛋白栋Peptone，酵母浸膏Yemt extract及葡萄糖Glucose各1%的肉汤)肉汤中培养呈均匀浑浊，或有黏稠沉淀物，在PYG琼脂深层中培养可产生大量气体，在厌氧肉肝汤中，培养5～6h即呈均匀浑浊，并产生大量气体。

　　γθ生化特性　本菌最为突出的生化特性，是对牛乳培养基的"暴烈发酵"。于接种培养8～10h后，发酵牛乳中的乳糖，使牛乳酸凝，同时产生大量气体便凝块破裂成多孔海绵状，严重时被冲成数段，甚至喷出管外，也有例外的菌株。

　　抵抗力　本菌在含糖的厌氧肉肝汤中，因产酸于几周内即可死亡，而在无糖厌氧肉肝汤中能生存几个月。芽孢在90℃30min或100℃5min死亡，而食物中毒型菌株的芽孢可耐煮沸13h。

　　抗原性及菌型　以菌体抗原进行血清型分类意义不大，而且菌体抗原与以毒素分型之间没有明显关系。毒素以小写希腊字母表示，有12种，均为蛋白质，分子量约在40000以上，其中。α、β、δ和τ。是主要致死毒素。依据主要致死性毒素与其抗毒素的中和试验可将此菌分为A、B、C、D和E 5个型，F型现被认为归于C型 (表22-6)。另外，A型和C、D型的某此菌株可产生肠毒素。

 

　　致病性　本菌致病作用主要在于它所产生的毒素。A型菌主要是引起人气性坏疽和食物中毒的病原，也引起动物的气性坏疽，还可引起牛、羔羊、新生羊驼、野山羊、驯鹿、仔猪、家兔等的肠毒血症;B型菌主要引起羔羊痢疾，还可引起驹、犊牛、羔羊、绵羊和山羊的肠毒血症或坏死性肠炎;C型菌主要是绵羊猝狙 (struck)的病原，也能引起羔羊、犊牛、仔猪、绵羊的肠毒血症和坏死性肠炎以及人的坏死性肠炎;D型菌引起羔羊、绵羊、山羊、牛以及灰鼠的肠毒血症;E型菌可致犊牛、羔羊肠毒血症，但很少发生。

　　实验动物以琢鼠、小鼠、鸽和幼猫最易感，家兔次之。以液体培养物0.l～1.Oml肌肉或皮下注射琢鼠，或胸肌注射鸽，常于12～24h引起死亡。给羔羊或幼兔喂服，可引起出血性肠炎并导致死亡。